CHANG Amnio羊水培養基使用說明

原代培養：原位法

1. 將羊水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人自己的羊水重懸細胞顆粒。例如，將10ml羊水紡絲上清吸至細胞顆粒上方0.5mL，再懸浮。在濃縮的細胞懸液中加入足夠的CHANG Amnio®，使最終鍍液體積為每個蓋片0.5mL(共4個蓋片)或每個小瓶2mL。

3.在37°C、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養。

4. 第2天淹水培養，加入2mL CHANG Amnio®。

5. 4 - 5天后，檢查培養物的生長情況。一旦觀察到生長情況，應飼喂培養物。去除所有培養上清，用2mL新鮮CHANG Amnio®替換培養物。建議以后每2天喂一次培養液。

6. 在第5天或之后檢查培養物的生長情況，當觀察到足夠的菌落時采摘。

7. 結果是在收獲前一天用CHANG Amnio進行培養。

原代培養：培養瓶法

1. 將羊水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人自己的羊水重懸細胞顆粒。例如，將10mL羊水紡絲上清吸至細胞顆粒上方1mL，再懸浮。加入4mL CHANG Amnio，總體積為每瓶5mL。

3.在37°C、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養。

4. 第5天檢查生長情況。用新鮮羊膜更換培養基，如果觀察到足夠的細胞生長就收割。

5. 檢查培養物的生長情況，此后每天更換培養基，直到觀察到足夠的菌落并準備收獲。

6. 結果是在收獲前一天用CHANG Amnio進行培養。

傳代培養

要傳代細胞，用胰蛋白酶(或pronase，等等)處理培養物，就像你通常在傳統培養基中培養細胞那樣。但是，應該仔細監測蛋白酶的處理。在CHANG羊膜中培養的羊水細胞對蛋白酶的敏感性高于在常規培養基中培養的羊水細胞。可能有必要修改您的協議以考慮到這一點。用于培養的培養基的pH值必須在6.65-7.44之間(即培養基必須是微黃的鮭魚色)。pH值可以很容易地調整，只需將培養基放在5%-8%的CO2培養箱中，輕輕松開蓋子約30分鐘。

注:羊膜常形成草酸鈣晶體。這些晶體的存在尚未被證明會對產品性能造成任何不利影響。

華雅思創生物集團——Irvine Scientific代理

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